Fase III

PRACTICA # 1   COLORACION DE MUESTRAS  BACTERIOLOGICAS

MATERIALES

-       Mechero

-       Laminas portaobjetos

-       Asa bacteriológica

-       Cultivo bacteriológico ( solido o liquido)

-       Cristal violeta

-       Lugol

-       Safranina

-       Microscopio

-       Aceite de inmersión.

PROCEDIMIENTO

1.    Encender el mechero

2.    Flamear el asa, dejarla enfriar unos segundos.

3.     Coger una pequeña cantidad del cultivo y extenderla en la lamina limpia.

4.    Dejar secar y fijar en calor

5.    Agregar cristal violeta de modo que cubra toda la muestra . dejar actuar por 1 minuto.

6.    Enjuagar

7.    Agregar Lugol de modo que cubra toda la muestra . dejar actuar por 1 minuto.

8.    Enjuagar.

9.    Agregar alcohol acetona dejar actuar 30 segundos.

10.  Enjuagar

11.  Agregar Safranina de modo que cubra toda la muestra. dejar actuar por 1 minuto.

12.  Enjuagar

13.  Dejar secar a temperatura ambiente.

14.  Observar en el microscopio.

Resultados para resolver en grupos

1.    Describa el tipo de coloración, la forma y el tipo de agrupación de las bacterias observadas.

Muestra en seco  Agua estancada

Coloración: gran negativa

Forma: bacilo

Agrupación: estreptobacilos

           Muestra de Levadura

Coloración: gran negativa                                                                                             

Forma:cocos                                                                                                                              

Agrupación: estreptococos, estafilococos, diplococos

Muestra de Sangre

Coloración: gran negativa

Forma: glóbulos rojos y blanco

Muestra de Carrillo

Coloración: gran negativa

Forma: células epiteliales, bacilos

Agrupación: estreptobacilos

Muestra colorida  Queso

Coloración: gran negativa

Forma: coco, bacilo

Agrupación: estreptococos, estafilococos, diplococos

            Muestra  de Pantano

Coloración de gram positivas                                                                                               

Forma: cocos                                                                                                                                

 Agrupación: estreptococos, estafilococos, diplococos

2. Cuál es el fundamento de la coloración de Gram.

Los fundamentos de la técnica se basan en las diferencias entre las paredes celulares de las bacterias Gram positivas y Gram negativas

La pared celular de las bacterias Gram positivas posee una gruesa capa de peptidoglucano, además de dos clases de ácidos teicoicos: Anclado en la cara interna de la pared celular y unido a la membrana plasmática, se encuentra el ácido lipoteicoico, y más en la superficie, el ácido teicoico que está anclado solamente en el peptidoglucano (también conocido como mureína)

Por el contrario, la capa de peptidoglucano de las Gram negativas es delgada, y se encuentra unida a una segunda membrana plasmática exterior (de composición distinta a la interna) por medio de lipoproteínas. Tiene una capa delgada de peptidoglicano unida a una membrana exterior por lipoproteínas. La membrana exterior está hecha de proteína, fosfolípido y lipopolisacárido.

Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se tiñen diferencialmente debido a estas direrencias constitutivas de su pared. La clave es el peptidoglicano, ya que es el material que confiere su rigidez a la pared celular bacteriana, y las Gram positivas lo poseen en mucha mayor proporción que las Gram negativas.

La diferencia que se observa en la resistencia a la decoloración, se debe a que la membrana externa de las Gram negativas es soluble en solventes orgánicos, como por ejemplo la mezcla de alcohol/acetona. La capa de peptidoglucano que posee es demasiado delgada como para poder retener el complejo de cristal violeta/yodo que se formó previamente, y por lo tanto este complejo se escapa, perdiéndose la coloración azul-violácea. Pero por el contrario, las Gram positivas, al poseer una pared celular más resistente y con mayor proporción de peptidoglicanos, no son susceptibles a la acción del solvente orgánico, sino que este actúa deshidratando los poros cerrándolos, lo que impide que pueda escaparse el complejo cristal violeta/yodo, y manteniendo la coloración azul-violácea.

3. Describa brevemente otras dos técnicas de coloración usadas en bacteriología diferentes a la de Gram.

Rodamina-auramina

Los ácidos micólicos de las paredes celulares de las micobacterias poseen afinidad para los fluorocromos auramina y rodamina. Estos colorantes se fijan a las bacterias, que aparecen de color amarillo o naranja brillante contra un fondo verdoso. El permanganato de potasio, empleado como contraste, evita la fluorescencia inespecífica. Todos los microorganismos ácido-alcohol resistentes, incluyendo los esporozoarios parásitos, se tiñen con estos colorantes.

Un aspecto importante de la coloración rodamina-auramiria es que luego los frotis pueden ser reteñidos con la coloración de Ziehl-Neelsen o Kinyoun directamente sobre la tinción con el fluorocromo, si se elimina antes el aceite de inmersión. De esta forma, los resultados positivos pueden ser confirmados con las coloraciones tradicionales, que además permiten la diferenciación morfológica.

Naranja de acridina

El fluorocromo naranja de acridina se une al ácido nucleico ya sea en su forma nativa o desnaturalizada. En algunas preparaciones de naranja de acridina, el color de la fluorescencia puede variar, dependiendo del pH y de la concentración. El naranja de acridina ha sido empleado como colorante vital, que da una fluorescencia verde si el microorganismo está vivo y roja si está muerto. De todos modos, como el colorante se intercala en el ácido nucleico, el germen viable se inactivará poco tiempo después de la tinción.

El uso de naranja de acridina para detectar la presencia de bacterias en los hemocultivos ha sido ampliamente aceptado. De hecho, una gran cantidad de estudios han demostrado que la tinción de hemocultivos con naranja de acridina es tan sensible como el subcultivo ciego para la detección inicial de hemocultivos positivos.

PRACTICA MEDIOS DE CULTIVO Y AISLAMIENTO DE BACTERIAS

MATERIALES

-       Mechero

-       Asa bacteriológica

-       Agar (medio de cultivo)

-       Cepas bacterianas.

-       Encubadora.

PROCEDIMIENTO

1.    Encender el mechero

2.    Flamear el asa, dejar enfriar un poco

3.    Dividir la caja de petri en tres áreas

4.    Hacer la siembra de los diferentes inoculos.

5.    Flamear el asa

RESULTADOS

1.    Describa las colonias obtenidas en el cultivo realizado en la practica

Esta muestra la obtuve frotando  una moneda de 200 pesos y después del cultivo,  pude observar estas bacterias todas gram negativas porque su tinción fue  de color rosado.

Muestra # 1  Observe bacilos, cocos, diplococos y espirilos

Bacilo

Tamaño: 3 mm

Borde: regular

Relieve: plano

Superficie: lisa

Pigmento: color rosado brillante

Consistencia: dura

Diplococos

Tamaño: 2 mm

Borde: regular

Relieve: convexo, plano

Superficie: lisa

 Pigmento: color rosado brillante

Consistencia: dura

Espirilos

Tamaño: 2 mm

Borde: irregular

Relieve: plano

Superficie: rugosa

 Pigmento: color rosado brillante

Consistencia: dura

Cocos

Tamaño: 1 mm

Borde: regular

Relieve: convexo, plano

Superficie: lisa

 Pigmento: color rosado brillante

Consistencia: dura

Muestra # 2  Observe cocos solamente

Cocos

Tamaño: 1 mm

Borde: regular

Relieve: convexo, plano

Superficie: lisa

 Pigmento: color rosado brillante

Consistencia: dura

La muestra que cogí fue de las partes de mi celular, la cual obtuve rosando con un hisopo por las teclas, la pantalla etc.

Tamaño: 2 mm                                                                                                                   

  Borde: irregular                                                                                                                    Relieve: plana                                                                                                          

Superficie: rugosa                                                                                                           Pigmento: opaca                                                                                                    

Consistencia: dura

Cultivo de bacterias de una moneda

Tamaño: 2 mm                                                                                                                 

 Borde: regular                                                                                                                    Relieve: plana, convexo                                                                                                        

Superficie: lisa                                                                                                     

Pigmento: opaca                                                                                                 

Consistencia: dura

En una caja de petri con agar nutritivo previamente preparado, se comienzan a sembrar las bacterias que han sido obtenidas de un lugar o elemento especifico, en este caso se froto una moneda. Luego se guardo la caja en la incubadora.

Después de 8 dias se observa las colonias de bacterias que crecieron en el cultivo en mi cultivo observe de 2 clases diferentes, unas de color blanco y otras de color amarillo.

Luego se toma una muestra de cada colonia de bacterias y se pone en el porta objetos para colorearlos e identificarlos si son gram positivas o gram negativas 

Las bacterias de los 2 cultivos se tiñeron color morado, lo que indico que son gram positivas en la muestra se encuentran cocos  diplococos y estafilococos

Cocos

Tamaño: 2 mm                                                                                                               

Borde: regular                                                                                                                    

Relieve: plana, convexo                                                                                                         

Superficie: lisa                                                                                                        

Pigmento: opaca                                                                                                    

Consistencia: dura

2.    Explique brevemente que es el agar y de donde se obtiene?

Agar-agar o agar es una sustancia gelatinosa derivada de algas marinas.El medio de cultivo es un polisacárido sin ramificaciones obtenido de la pared celular de varias especies de algas rojas de los géneros Gelidium, Euchema y Gracilaria entre otros actuando como pigmento que da un color característico a cada una. La palabra agar viene del malayoagar-agar, que significa jalea.

Químicamente el agar es un polímero de subunidades degalactosa; en realidad es una mezcla heterogénea de dos clases de polisacáridos: agaropectina y agarosa. Aunque ambas clases de polisacáridos comparten el mismo esqueleto de galactosa, la agaropectina está modificada con grupos ácidos, tales comosulfato y piruvato. Los polisacáridos de agar sirven como la estructura primaria de la pared celular de las algas. Disuelto en agua caliente y enfriado se vuelve gelatinoso. Su uso principal es como medio de cultivo en microbiología, otros usos son como laxante, espesante para sopas, gelatinas vegetales,helados y algunos postres y como agente aclarador de la cerveza.

3.    Explique que es un medio de enriquecimiento y cite algunos ejemplos.

Medios de enriquecimiento
Se llama enriquecimiento a cualquier cultivo en medio líquido que resulte en un incremento en el número de un tipo dado de microorganismo en relación con el número de otros tipos de microorganismos que puedan estar en el inóculo. Un medio de enriquecimiento puede contener
sustancias que favorezcan el crecimiento del microorganismo que nos interesa o que inhiban el crecimiento de los otros tipos de microorganismos presentes. La selectividad de un cultivo de enriquecimiento no está determinada únicamente por la composición química del medio usado, sino que en un medio dado puede ser variada significativamente modificando otros factores tales como: temperatura, pH, fuerza iónica, iluminación, aireación etc.

Ejemplos:

·         Caldo tetrationato utilizado para el enriquecimiento de las especies del
género Salmonella provenientes de muestras de heces, orina, agua o
alimentos.

4.    Cuál es la importancia del aislamiento de una bacteria

El aislamiento de bacterias a partir de muestras naturales se realiza, en la mayoría de los casos, mediante la producción de colonias aisladas en cultivos sólidos. El crecimiento explosivo de las bacterias permite producir un gran número de ellas a partir de una única célula inicial de forma que, tras un periodo de incubación en las condiciones ambientales adecuadas, se produce una colonia observable a simple vista y formada por individuos iguales (un clon bacteriano).

Sin embargo, no todos los microorganismos presentes en las muestras ambientales son cultivables (microorganismos no cultivables). Esto es debido a dificultades intrínsecas en el cultivo (microorganismos parásitos de otros), al desconocimiento de los requerimientos específicos de cultivo, y a la existencia de grupos de microorganismos que deben mantenerse en equilibrio para poder sobrevivir (casos de sintrofía por ejemplo).

Se estima que en sólo en torno al 1% de las bacterias del suelo al 0,1 - 0,01 % de las bacterias marinas son cultivables. Existen procedimientos de enriquecimiento del número de bacterias de ambientes naturales para facilitar su aislamiento. Uno de ellos es la Columna de Winogradski  que crea un microcosmos para enriquecer el número de ciertos tipos de microorganismos presentes en ambientes naturales con objeto de facilitar su aislamiento.

PRACTICA # 3 PRUEBAS DE SENSIBILIDAD (ANTIBIOGRAMAS)

MATERIALES

-       Medio de cultivo Mueller Hinton

-       Inoculo de bacterias

-       Sensidiscos

-       Pinzas

-       Medio de cultivo BHI

-       Escobillón

PROCEDIMIENTO

1.    Encender el mechero

2.    Tomar un inoculo de un cultivo puro

3.    Agregar este inoculo en 5ml de BHI, incubar a 36° C por 2 horas.

4.    Introducir al BHI un escobillón estéril y se impregna bien, remover el exceso en las paredes del tubo.

5.    Sembrar en el agar Mueller Hinton extendiendo el inoculo uniformemente, para garantizar una distribución homogénea.

6.    Dejar secar la caja por 5 minutos.

7.    Con una pinza estéril, o con un dispensador colocar los discos con los diferentes antimicrobianos sobre la superficie del agar presionándoles suavemente.

8.    Las cajas se incuban a 35°C 

9.    A las 18 horas de incubación se miden los diámetros de los halos de inhibición de crecimiento para cada antimicrobiano.

INFORME DE RESULTADOS

1.    Informe los resultados obtenidos en la práctica,

a)    A que se deben estos resultados (en términos de sensibilidad o resistencia.)

Luisa Arbeláez

Agente antimicrobiano	Sigla	Resistencia	Medida	Susceptible
Tetraciclina	(T.E)		11 mm	Sensible o susceptible
Penicilina	(P)		0 mm	Resistente
Rifampicina	(R.D)		6 mm	Resistente
Gentamicina	(C.N)		7 mm	Resistente
Vancomicina	(V.A)		7 mm	Resistente

     

Antibiótico	Halo de inhibición	Medida	Susceptible o resistente
Tetraciclina (T.E)		12mm	Susceptible
Gentamicina		10mm	Resistente
Vancomicina (V.A)		7mm	Resistente
Rifampicina (R.D)		5mm	Resistente
Penicilina (P)		10mm	Resistente

Antibiótico	Halo de inhibición	Medida	Susceptible o resistente
Tetraciclina (T.E)		12mm	Susceptible
Gentamicina (C.N)		10mm	Resistente
Vancomicina (V.A)		7mm	Resistente
Rifampicina (R.D)		6mm	Resistente
Penicilina (P)			Resistente

En una caja de petri con agar nutritivo se realiza un frote con un líquido impregnado de bacterias tipo ecoli. El frote se realiza de manera que la bacteria quede esparcida por todo el espacio.

Después de sembrar la bacteria, en donde se encuentran las x se colocan los sencidiscos que contienen: T.E tetraciclina – P: penicilina – R.D: rifanpicina – C.N: gentamicina – V.A: vancomicina

Los círculos representan  la efectividad de cada medicamento para tratar esta bacteria

T.E: 11 ml – P: 0 ml – R.D: 6 ml – C.N: 12 ml – V.A: 7 ml

Agente antimicrobiano	Sigla	Resistencia	Medida	Susceptible
Tetraciclina	(TE)		11 mm	Susceptible
Penicilina	(P)		0 mm	Resistente
Rifampicina	(RD)		6 mm	Resistente
Gentamicina	(CN)		12 mm	Susceptible
Vancomicina	(VA)		7 mm	Resistente

Antibiótico	Halo de inhibición	Mi medida	Susceptible o resistente
Tetraciclina (T.E)		11mm	Susceptible
Cefalexina (C.N)		9mm	Resistente
Vancomicina (V.A)		8mm	Resistente
Rifampicina (R)		7mm	Resistente
Penicilina (P)		11mm	Resistente

b)    Explique el modo de acción de dos de los antimicrobianos utilizados

Gentamicina: se emplea como antibiótico para erradicar infecciones contra bacterias sensibles. Sirve para tratar diversas enfermedades graves de piel, pulmón, estómago, vías urinarias y sangre. Su uso está indicado cuando la administración de otros antibióticos menos potentes haya sido ineficaz. Debido a su gran toxicidad y a los múltiples efectos secundarios, ha de evitarse su uso si no es estrictamente necesario. Se concentran en oído y riñón, por lo tanto tienen efectos ototóxicos y nefrotóxicos.                                                                                                                                                                                                         La Gentamicina sigue siendo el aminoglucósido de elección para las infecciones intrahospitalarias por Enterobacterias en instituciones con mínima resistencia bacteriana a la misma.

Tetraciclina: las tetraciclinas naturales se extraen de las bacterias del género Actinomyces. Del Streptomyces aurofaciens se extraen la clortetraciclina y la demetilclortetraciclina, del S. rimosus se extrae la oxitetraciclina, y la tetraciclina.                                                                                                                                                                                Las tetraciclinas se absorben de forma rápida y completa a nivel de tubo pancreático, fundamentalmente en intestino delgado, y alcanzan su máxima concentración en sangre en un plazo de entre tres y seis horas. De manera parenteral se absorben de forma óptima. Actúan fundamentalmente como bacteriostáticos a las dosis habituales, aunque resultan bactericidas a altas dosis, generalmente tóxicas. Actúan por varios mecanismos. Desacoplan la fosforilación  oxidativa de las bacterias.  Provocan una inhibición de la síntesis proteica en el ribosoma de la bacteria. Actúan inhibiendo la síntesis proteica al unirse a la subunidad 30 S del ribosoma y no permitir la unión del ácido ribonucleico de Transferencia (tRNA) a este, ni el transporte de aminoácidos hasta la subunidad

  Existe también evidencia preliminar que sugiere que las tetraciclinas alteran la membrana citoplasmática de organismos susceptibles, permitiendo la salida de componentes intracelulares.

c)    Explique a que se debe la resistencia  bacteriana.

La resistencia bacteriana es la capacidad que tienen las bacterias de soportar los efectos de los antibióticos o biocidas destinados a eliminarlas o controlarlas.

Factores que pueden desencadenar resistencia bacteriana, los principales son la prevalencia de los genes de resistencia y la amplia utilización de antibióticos. Las bacterias resistentes a los antibióticos no son más virulentas que las susceptibles, ya que se requiere la misma cantidad de gérmenes para producir enfermedad. Sin embargo, las formas resistentes son más difíciles de eliminar. Una vez que se suspende el tratamiento antibiótico, las bacterias resistentes pueden persistir durante un tiempo; si existen bacterias susceptibles en la vecindad, éstas pueden recolonizar al individuo. En ausencia de antibióticos los gérmenes susceptibles pueden sobrevivir mejor debido a que no deben gastar energía en mantener genes de resistencia. La utilización de antibióticos selecciona y promueve el crecimiento de bacterias no susceptibles a estos fármacos. Cuando una bacteria es expuesta a un antimicrobiano, los microorganismos susceptibles mueren, pero aquellos no sensibles al fármaco pueden sobrevivir y crecer si la cantidad del antibiótico es muy baja para eliminarlos. A medida que continúa el tratamiento algunas células sobrevivientes adquieren una resistencia todavía más importante, a través de mutación genética que genera una nueva cepa resistente o a través del intercambio genético con nuevas bacterias. Estas células
PRACTICA # 4 IDENTIFICACION DE  MOHOS Y LEVADURAS

MATERIALES

-       Mechero

-       Microscopio

-       Medio de cultivo saborau

-       Asa bacteriológica

-       Inoculo de moho y levadura

-       Papel

-       Cinta.

-       Portaobjetos

-       KoH

PROCEDIMIENTO

-       Encender el mechero

-       Flamear el asa de chuzo

-       Tomar el inoculo y sembrarlo en el medio de cultivo indicado.

-       Sellar el medio de cultivo y cubrirlo con papel kraff

-       Dejarlo a temperatura ambiente durante 5 días.

-       Leer los resultados obtenidos.

INFORME DE RESULTADOS

1.    Reporte los resultados obtenidos en la práctica.

a)    Descripción macroscópica de la colonia. Tener en cuenta factores como color, textura, forma.

Levadura: eran de textura cremosas,  de formas alargadas, las colonias en si eran verticales, ubicadas de manera uniforme. El color era como amarillo tirando a color piel

Mohos: textura de esporas como redondos, tenían forma ramificada, las colinas en si eran circulares,  de color gris por los bordes y en el centro verde en grumos

Levaduras: estas crecen de abajo hacia arriba, su color es blanco y amarillento, de textura suave y cremosa.

Mohos: estos crecen desde el centro, su color es verdoso, aunque algunas son de color café y su rededor es blanco, su textura es áspera, esponjosa y polvorienta.

b)    Según la descripción anterior podría decirse que es un moho o una levadura? Y porque

Se puede decir que es una levadura o un moho, por la misma  forma en que se cultivaron o crecieron que hace muy fácil  diferenciar entre el uno o el otro, como se describe anteriormente, por las variaciones  de características

2.    Describa brevemente 3 hongos que generen problemas para el hombre y 3 que generen beneficios.

Hongos que generan problemas

·         El pie de atleta o tinea pedis es una infección micótica producida por hongos dermatofitos (que se alimentan de queratina) o por levaduras (casos muy raros con alteración del sistema inmune). Afecta los pliegues interdigitales, la planta y los bordes del pie.

El pie de atleta es más frecuente en hombres que en mujeres, y se ve tanto en niños como en adultos. Los atletas y deportistas tienen una mayor morbilidad a la tiña pedis. El contagio es por transmisión directa de persona a persona, así como de superficies húmedas donde el hongo persiste por meses, tales como piscinas, baños, duchas, toallas, alfombras, en cuarteles, colegios, saunas, hoteles y gimnasios. El mantener el pie húmedo (sudor, por ejemplo) por tiempos prolongados y uso de calzado cerrado como las botas aumenta el riesgo de aparición o permanencia de la infección pues crea un ambiente cálido, húmedo y oscuro favorable para el hongo. Es frecuente ver el paso del organismo a zonas distantes del pie a través de toallas, ropa contaminada y sábanas, entre otras.

El pie de atleta causa enrojecimiento y picor constante. Algunos casos pueden presentarse sin síntomas, excepto por la característica maloliente de la infección. Es frecuente ver también grietas, ampollas y escamas en el área afectada. En casos de mala circulación periférica en las extremidades, como en ciertos pacientes diabéticos, pueden presentarse complicaciones infecciosas, celulitis y amputaciones del pie.

·         La Tinea unguiüm, onicomicosis o tiña de las uñas es una infección superficial en las uñas de manos o pies causadas por hongos dermatofitos de los géneros Trichophyton y Microsporum.

Las uñas de los pies se ven más afectadas que las de las manos, afectando a los adultos con más frecuencia que los niños. Otros factores de riesgo incluyen la práctica de deportes, la diabetes, circulación pobre en las extremidades y el uso incorrecto de zapatos.

Usualmente no cursa con síntomas, siendo un problema mayormente cosmético al mostrar uñas de coloración blanquecina o amarillenta, quebradas, frágiles y deformes. Al progresar la infección se ve la separación de la lámina ungueal del lecho de la uña. Ocasionalmente se puede acompañar de dolor, o incomodidad y raramente se observa celulitis de la piel vecina. El extremo distal de la uña es la que se afecta con muchísima más frecuencia.

El tratamiento tópico (cremas y ungüentos o líquidos) por sí mismo tiene una baja tasa de efectividad en el tratamiento de la dermatofitosis de las uñas, por lo que generalmente se asocian antifúngicos orales como el itraconazol o fluconazol, los cuales han de ser tomados por un largo período de tiempo (hasta año y medio).

·          La Tinea corporis es una infección superficial de la piel en cualquier parte del cuerpo humano causado por hongos dermatofitos de los géneros Microsporum Epidermophyton y Trichophyton. Otras áreas como las axilas, palmas y plantas de las manos y pies y la  ingle pueden ser afectados.

La tinea corporis es una dermatofitosis muy frecuente alrededor del mundo particularmente en zonas cálidas y húmedas.

En niños predominan las especies M. canis (la más frecuente) y T. tonsurans. En adultos son más frecuentes las infecciones por T. rubrum seguido de M. canis.

Las tineas de la piel tienen un aspecto circular característico con bordes eritematosos y descamados con pequeñas vesículas y/o pápulas. Son lesiones pruríticas y aparecen en cualquier parte de la piel expuesta y lampiña, con más frecuencia en la cara, brazos y espalda.

La dermatitis seborreica, Candidiasis cutánea y la psoriasis son muy similares en su presentación clínica. El examen directo con KOH al 30% y el cultivo micológico (agar de Sabouraud) confirmará la dermatofitosis correcta, de existir una.

Es una infección de fácil resolución si se recupera la higiene de la zona afectada (limpia y seca). Tratamientos antimicóticos como el Miconazol o el Clotrimazol son efectivos en controlar estos organismos.

Hongos benéficos

·         La gírgola, champiñón ostra o pleuroto en forma de ostra (Pleurotus ostreatus) es un hongo comestible, estrechamente emparentado con la seta de cardo (Pleurotus eryngii), que se consume ampliamente por su sabor y la facilidad de su identificación.

Tanto el nombre común como el latino se refieren a la forma de esta especie de seta. El vocablo latino pleurotus (de lado) se refiere al crecimiento del tallo con respecto al bonete o parte superior, mientras que la palabra latina ostreatus (que en inglés común recibe el nombre de ostra) se refiere a la forma del bonete en sí, que se asemeja al bivalvo del mismo nombre. El champiñón ostra es uno de los hongos salvajes más codiciados, aunque también pueden ser cultivados sobre paja y otros ambientes. Con frecuencia presentan un aroma a anís debido a la presencia de Benzaldehído.

Tiene  efecto remineralizante es muy útil en caso de personas enfermas o aquellas que no pueden tomar carne (contienen proteínas fácilmente asimilables)
Su contenido en Selenio le confiere un efecto antioxidante. En general contienen
88 % de agua, 4 - 5 % de proteínas, 6 % de hidratos de carbono, 0´3 % de grasas.

·         Trametes versicolor antes conocido como Coriolus versicolor y Polyporus. Es muy común Polypore setas que se pueden encontrar en todo el mundo variedad.

 Valor Medicamentos

Polisacárido-K (Krestin, PSK), es una proteína con destino polisacáridos aislados de Trametes versicolor, que se utiliza como un sistema inmunológico aumentando agente en el tratamiento del cáncer en algunos países Europea como China y Japón. En Japón, está aprobado como adyuvante de la terapia del cáncer  y está cubierto por seguro de salud del gobierno.

·         PSK ha documentado la actividad in vitro contra el cáncer , in vivo y en los ensayos clínicos humanos. La investigación también ha demostrado que puede reducir la PSK mutágeno inducida por la radiación, y de forma espontánea inducida por el desarrollo del cáncer. PSK ha demostrado ser beneficioso como coadyuvante en el tratamiento de estómago, de esófago, cáncer colorrectal y cáncer de pulmón. Ensayos clínicos en humanos sugieren PSK puede reducir la recurrencia del cáncer cuando se utiliza como adyuvante y la investigación ha demostrado que el hongo puede inhibir ciertas líneas celulares de cáncer humano in vitro. Además, en estudios in vitro han demostrado que una mezcla de nutracéuticos ( MC-S ) de PSK, lentinan y otros extractos de hongos también pueden inhibir el cáncer de la proliferación celular.

·         Penicillium chrysogenum  (antes llamado Penicillium notatum) es el hongo del que se obtuvo el antibiótico penicilina, descubierto por Alexander Fleming en 1928. La cepa de Penicillium notatum aislada por Fleming producía 2 mg de penicilina por cada litro de cultivo, posteriormente se encontró que otros Penicillium eran mejores productores de penicilina y se eligió a Penicillium chrysogenum como cepa superproductora de este antibiótico. Finalmente, la selección de sucesivos mutantes superproductores y la mejora en las técnicas de fermentación realizadas por la industria biotecnológica han hecho que actualmente se obtengan 20 g/L de penicilina.

3.    Explique las diferencias entre los hongos y las bacterias.

Bacterias

·         Pertenecen al reino mónera

·         Organismos unicelulares y procariotas

·         Nivel de organización: protoplasmático

·         Sistema de nutrición: autótrofa, heterótrofa

·         Las bacterias son células muy pequeñas y tienen reproducción asexual. tienen pared celular porosa. presentan diferentes formas (cocos, bacilos, espirilos, vibriones).

·         Producen enfermedades (tuberculosis, lepra, sífilis, neumonia, etc.)

·         Hay bacterias beneficiosas (producción de alcohol y vinagre, quesos, yogurth, etc.)

·         Las bacterias tienen una estructura citoplasmática muy sencilla con carencia de todos los orgánulos a excepción de los ribosomas y, lo que es más característico, la ausencia de una membrana nuclear que envuelva el ADN (el material hereditario).

·         El mecanismo de reproducción habitual en bacterias es la bipartición. Mediante este mecanismo se obtienen dos células hijas, con idéntica información en el ADN

Hongos

·   Pertenecen al reino fungí

·   Organismos pluricelulares y eucariotas.

·   Sistema de nutrición: absorción.

·   Nivel de organización: tisular (mohos, que son unicelulares) y orgánico (hongos de sombrero, que son pluricelulares).

·   No poseen clorofila.

·   Son de vida fija.

·   Presentan células modificadas y especializadas llamadas hifas (únicas en estos seres).

·   Algunos son saprófitos y otros son parásitos.

·   Algunos hongos son beneficiosos, ya que liberan sustancias nutritivas como compuestos de carbono, nitrógeno y fósforo y liberan minerales que pueden usar las plantas. el Penicillium se utiliza para la producción de la penicilina.

·   Los hongos parásitos son nocivos pues producen enfermedades y afectan a  los cultivos

·   La mayoría de los hongos se reproducen por esporas, diminutas partículas de protoplasma rodeado de pared celular, como el es caso de los mohos.

·   En los hongos hay dos formas de reproducción: sexual y asexual, aunque en algunas especies coexisten ambas formas en el mismo organismo (holomorfo), denominándose estado perfecto o teleomorfo a la forma sexual y estado imperfecto o anamorfo a la asexual

·   Algunos hongos como las levaduras se reproducen por  gemación  que es un tipo de reproducción asexual. Es una división desigual, consistente en la formación de prominencias o yemas sobre el individuo progenitor, que al crecer y desarrollarse originan nuevos seres que pueden separarse del organismo parental o quedar unidos a él, iniciando así una colonia

IN

PRÁCTICA

IDENTIFICACIÓN DE METABOLITOS SECUNDARIOS

OBJETIVO DE LA PRÁCTICA: identificación de metabolitos secundarios mediante pruebas químicas rápidas de coloración y/o precipitación sobre muestras de plantas conocidas

MUESTRA	METABOLITO SECUNDARIO	REACTIVO	OBSERVACIONES
Café	Positivo Alcaloide	Acido sulfúrico 5 % Reactivo de Bouchardat	Genero un  precipitado
Borrachero	Positivo Alcaloide	Acido sulfúrico 5 % Reactivo de Bouchardat	Genero un  precipitado y un poco de turbidez

MUESTRA		METABOLITO SECUNDARIO	REACTIVO	OBSERVACIONES
Uvas		Negativo Saponinas	Agua	No se formo abundante espuma, por periodo de   5 minutos
Moras		Negativo Saponinas	Agua	No se formo abundante espuma, por 5 minutos
Gengibre		Negativo Saponinas	Agua	No se formo espuma luego de haberlo agitado vigorosamente
Repollo	Negativo Saponinas		Agua		No se formo espuma luego de haberlo agitado

MUESTRA		METABOLITO SECUNDARIO	REACTIVO	OBSERVACIONES
Uvas		Negativos Taninos	Gelatina sin sabor	No se formo precipitado en la muestra
Repollo		Negativos Taninos	Gelatina sin sabor	No se formo precipitado ni turbidez en la muestra
Moras	Negativos Taninos		Gelatina sin sabor		No se formo precipitado ni turbidez en la muestra

MUESTRA	METABOLITO SECUNDARIO	REACTIVO	OBSERVACIONES
Uvas	Negativo Fenol	Tricloruro férrico 1%	No se pudo observar ninguno de estos colores  azul, verde, negro, lo cual nos indica una respuesta negativa
Repollo	Positivo Fenol	Tricloruro férrico 1%	Se pudo observar un color negro
Moras	Positivo Fenol	Tricloruro férrico 1%	Observamos un color verde

MUESTRA		METABOLITO SECUNDARIO	REACTIVO	OBSERVACIONES
Uvas		Positivo Flavonoides	Etanol Limadura de magnesio Acido Clorhídrico	Si dio da  naranja, rojo, violeta ó rosado, indican que la prueba es positiva (+) para flavonoides
Moras		Positivo Flavonoides	Etanol Limadura de magnesio Acido Clorhídrico	Se observo un color rojo indican que la prueba es positiva
Flor amarilla		Negativo Flavonoides	Etanol Limadura de magnesio Acido Clorhídrico	No se  pudo observar ningún color naranja, rojo, violeta ó rosado, esto indican que la prueba es negativa
Repollo	Positivo Flavonoides		Etanol Limadura de magnesio Acido Clorhídrico	Se pudo observar un color fucsia intenso, indicando que es totalmente positivo

MUESTRA	METABOLITO SECUNDARIO	REACTIVO	OBSERVACIONES
Gengibre	Negativo Esteroides	Anihidrico acético Cloroformo Acido sulfúrico concentrado	No se observo ninguno de estos  colores  verde, azul o violeta por eso no es positivo, el único color que se pudo observar fue un café claro

PRÁCTICA

DETECCIÓN DE ADULTERACIONES Y/O FALSIFICACIONES EN

DROGAS EN POLVO

RESULTADOS QUE SE OBTUVIERON EN LA PRÁCTICA

Pruebas de solubilidad en agua.

MUESTRAS	SOLUBILIDAD	CARACTERÍSTICAS
Carbonato de calcio	Insoluble	Presenta un precipitado en dos fases, obteniendo un color gris.
Almidón	Insoluble	Se presentan un precipitado en dos fases de color blanco
Goma arábiga	Soluble	Se disuelve completamente en el agua y tiene un color amarilloso y se da un estado gelatinoso.

Pruebas con carbonato de calcio.

MUESTRAS	PRESENCIA DE CARBONATO DE CALCIO	CARACTERÍSTICAS
Ablanda carnes	No presenta	Al adicionar el acido sulfúrico diluido no se presentan cambios (efervescencia)
Harina	No presenta	Al adicionar el acido sulfúrico diluido este no presento efervescencia.
Muestra desconocida	Si presenta	Presenta efervescencia, lo que indica que hay contaminación.

Presencia de aceites fijos y/o aceites esenciales

MUESTRA	PRESENCIA DE ACEITES	CARACTERÍSTICAS
Maní	Si presenta	Se presenta una mancha oleosa. Esta sustancia fue la que mas aceite presento.
Linaza	Si presenta	Presenta un olor aceitoso
canela	Si presenta, aunque en muy poca cantidad, porque la muestra se encontraba demasiado volatilizada.	Contiene olores aromáticos y dulces.

Presencia de saponinas, taninos y fenoles

MUESTRA	SAPONINAS	TANINOS	FENOLES
Nuez moscada	Negativo	negativo	Negativo, se presenta un color amarilloso.
Clavos molidos	Negativo	Negativo	Positivo, presenta un color negro
Jengibre	Negativo	Positivo	Positivo, presenta color verde
Ruibarbo	Positivo	Prueba no realizada	Prueba no realizada
Cardamomo	negativo	Prueba no realizada	Prueba no realizada

Presencia de almidón

MUESTRA	PRESENCIA DE ALMIDÓN	CARACTERÍSTICAS
Jengibre	Si presenta	Al adicionar lugol a la muestra, se presenta un color morado oscuro.
Ruibarbo	No presenta	No es muy probable la contaminación por el color amarillento que posee este condimento.
Sustancia desconocida	Si presenta	Al adicionar lugol a la muestra, presenta un color morado claro, ya que no contiene mucha cantidad de almidón.

FORME DE LABORATORIO

REALIZACIÓN DEL PRODUCTO

GEL MANZATIL

OBJETIVO SOCIAL

Realizar  un producto con extractos  naturales de manzanilla para controlar la aparición, inflación y disminuir las secuelas producidas por el acné.

PLANTEAMIENTO Y SOLUCIÓN AL PROBLEMA

Teniendo en cuenta que el acné se presenta en la mayor parte de la población, pero más que todo en los jóvenes  debido a factores  hormonales, cosméticos, ambientales, emocionales y alimenticios; con este producto esperamos poder disminuir y tratar estas afecciones para que la persona se sienta bien consigo misma y mejore su  autoestima.

FORMA FARMACÉUTICA

Un gel es un sistema coloidal donde la fase continua es sólida y la dispersa es líquida. Los geles presentan una densidad similar a los líquidos, sin embargo su estructura se asemeja más a la de un sólido.

BENEFICIOS DE LA FORMA FARMACÉUTICA

Tras su aplicación desaparecen rápida y completamente, lo que les otorga un aspecto cosmético excelente. Admite la incorporación de numerosos principios activos bien a través de su fase acuosa, sea ésta un líquido orgánico o agua.

Ventajas

·         Son bien tolerados

·         Fácilmente lavables

·         Producen frescor

·         No deben manchar, en la medida de lo posible, ni la piel ni los tejidos

·         No deben presentar efectos de irritación primaria ni de hipersensibilización

Desventajas

·         Incompatibilidad con numerosos principios activos

·         Tendencia a la desecación

·         Bajo poder de penetración (indicados para tratamientos superficie

DESCRIPCIÓN DE LA PLANTA MANZANILLA

(Chamaemelum nobile) Hierba originaria del sudeste de Europa y Asia Menor. Crece en climas cálidos, semicálidos, semisecos y templados. Abunda en caminos, prados y campos, cultivadas o silvestres. Pertenece a la familia de las compuestas, como el girasol y los crisantemos.

Presenta un fuerte aroma, frondosa y rastrera que no sobrepasa los 60 cm. de altura. Su tallo glabro erecto ramificado, cilíndrico y estriado, es de color verde blanquecino, sus hojas son alternas y divididas con lóbulos dentados, las flores en capítulos de hasta 2'5 cm de diámetro son de color amarillo en el centro y rodeadas de lígulas blancas, están dispuestas en cabezuelas solitarias al final del pedúnculo. Se reproduce por semilla. 

PROPIEDADES DE LA PLANTA

·         Es un antiinflamatorio. ayuda a aliviar los procesos de inflamación tanto tomándola o usándola externamente.

·         Tiene propiedades antimicrobianas y fungicidas

·         Ayuda con la cicatrización

·         En cosmética se le usa para aclarar el pelo, descongestionar la piel y calmar irritaciones

CONTRAINDICACIONES DE LA PLANTA

Entre las contraindicaciones están: Alergias (casos raros). No se recomienda durante el primer trimestre del embarazo porque puede tener efectos abortivos.

En medicina Maya se le considera una hierba caliente que en altas cantidades puede causar problemas con el sistema urinario.

REACTIVOS

Cabezuelas de las flores frescas…………….. ……………………….cantidad suficiente

Alcohol antiséptico al 70%................................................................ 250ml

Carbomero…………………………………………………………………7gr

Agua…………………………………………………………………………300ml

Acido salicílico………………………………………………………………0.8gr

Trietanolamina…………………………………………………………….. 20 gotas

Acido benzoico……………………………………………………………..1 pisca

Glicerina…………………………………………………………………….. 5ml

Propilenglicol…………………………………………………………………5ml

Alcanfor………………………………………………………………………0.5gr

Mentol………………………………………………………………………..0.5gr

Goma arábiga……………………………………………………………….20ml caliente

MATERIALES

Beaker de 100 y 500ml

Probeta de  10 y 100ml

Mortero y pistilo

Agitador

Espátula

Pipeta paster

Pesa

Vidrio de reloj

Tirillas de pH

Recipientes de 120ml para reenvasar

TIEMPOS

Extracción de la manzanilla…………………………. 3 días

Hidratación del carbomero……………………………2 días mínimo

Hacer la preparación…………………………………..2 horas

VOLUMEN FINAL DE LA EXTRACCION

Al agregar las cabezuelas de la manzanilla en el alcohol antiséptico se obtuvo un volumen de 300ml

PH DE EL GEL ELABORADO

El pH final del producto farmacéutico preparado fue de 4

PH DE LA MANZANILLA

Chamaemelum nobile (manzanilla) tiene un pH entre  4.5 y  7.5

PH DEL ACIDO SALICÍLICO

PH ácido de 2 a 3 

FICHA TÉCNICA DE LOS REACTIVOS

CARBOMERO

Origen: resultan de la asociación de varias moléculas orgánicas complejas como polímeros. Generalmente se neutralizan, con una base mineral  orgánica, como el hidróxido sódico o la trietanolamina.

Lote: 075464

Fecha de vencimiento: enero 30 del 2014

Uso a nivel farmacéutico: se utiliza para formulaciones tópicas y adecuado para la preparación de los geles, cremas y agente de acoplamiento utilizado. se puede encontrar en una amplia variedad de tipos de productos incluyendo la piel, cabello, uñas y productos de maquillaje.

ACIDO SALICÍLICO

Origen: el acido salicílico se obtiene de la corteza de sauce blanco que es el nombre del género del árbol, es decir su origen es vegetal. Ha sido usada desde tiempo inmemorial

Lote: 100370

Fecha de fabricación: año  2010

Fecha de vencimiento: año 2015

Uso a nivel farmacéutico: el ácido salicílico es el aditivo clave en muchos productos para el cuidado de la piel diseñados para tratar el acné causando que las células de la piel se caigan más fácilmente, evitando que los poros se tapen. este efecto en las células de la piel también hace que el ácido salicílico sea un ingrediente activo en varios champús diseñados para tratar la caspa.

TRIETANOLAMINA

Origen: la trietanolamina es a base mineral orgánica

Uso a nivel farmacéutico: es utilizada como neutralizante, sirve para dar textura a los preparados magistrales específicamente a los geles.

ACIDO BENZOICO

Origen: el ácido benzoico, los benzoatos y los ésteres del ácido benzoico son compuestos comúnmente encontrados en la mayoría de las frutas, es decir es de origen vegetal

Lote: 2715110081408a

Fecha de vencimiento: diciembre del 2012

Uso a nivel farmacéutico: es usado como conservante ya que actúa en contra de las levaduras y las bacterias y en menor proporción en los hongos, son eficientes en productos de un pH superior  a 5 es decir ligeramente acido o neutro

GLICERINA

Origen: la glicerina o glicerol está presente en todos los aceites y grasas animales y vegetales de la forma combinada

Lote: 076251

Fecha de vencimiento: septiembre 3 del 2012

Uso a nivel farmacéutico: tiene acción suavizante en la piel y a su vez sirve para dar estabilidad al preparado farmacéutico o al cosmético.

PROPILENGLICOL

Origen: el propilenglicol es un líquido incoloro e inocuo que se hace a base de glicerina y por ende tiene origen vegetal y animal

Lote: 076914

Uso a nivel farmacéutico: previene la formación de mohos y bacterias. en segundo lugar, este compuesto forma una capa delgada en la superficie del humidificador, que permite absorber la humedad en niveles del 70%. Además tiene acción suavizante en la piel

ALCANFOR

Origen: el alcanfor es una sustancia semisólida cristalina y cerosa con un fuerte y penetrante olor acre. Se encuentra en la madera del árbol alcanforero, es decir su origen es vegetal

Lote: 091273-2

Fecha de vencimiento: año 2017

Uso a nivel farmacéutico: el alcanfor es rápidamente absorbido por la piel, reportando una sensación de enfriamiento similar a la del mentol, actuando como un anestésico local leve y como antimicrobiano

MENTOL CRISTAL:

Origen: el mentol es un compuesto obtenido a partir de aceite de menta o de otros aceites de menta o de origen sintético. 

Lote: 0000057-2

Uso a nivel farmacéutico: el mentol tiene cualidades anestésicas locales y contrairritantes, para dar sensación refrescante  y además sirve como conservante.

GOMA ARÁBIGA

Origen: la goma arábiga tradicionalmente se obtiene de varias especies de árboles de acacias, fundamentalmente de acacia senegal, es decir de origen vegetal

Lote: 059957

Uso a nivel farmacéutico: es uno de los espesantes permitidos como ingrediente en la fabricación de medios de consumo sin muchas restricciones. Proporciona  la estabilidad de suspensiones y coloides

CONCLUSIONES

La mayoría de las preparaciones magistrales solo pueden ser usadas por un periodo de 6 meses.

En las preparaciones magistrales hay que tener un orden adecuado de adicionar los diversos reactivos y sustancias, esto con el fin de incorporarlos completamente  para garantizar la consistencia y  calidad del magistral.

Un  gel debe tener o mantiene un PH de  5,5 que es el ideal para la piel.

Para hidratar un carbopol es necesario esparcir dicho polvo y luego ir incorporando por partes y despacio el agua con el fin de romper completamente los enlaces.

Además de las propiedades del producto, la manzanilla también es utilizada en problemas digestivos, es calmante y tranquilizante, actúa como un sedante suave. Se  usa en caso de irritabilidad, tristeza y ansiedad, ayuda a controlar el eczema y las hemorroides.




El uso directo de una solución salicílica puede causar hiperpigmentación en piel, por esto es           importante que se aplique el protector solar diario, en caso de que este utilizando algún producto con este componente.




El producto Manzatil por su extracto de manzanilla y acido salicílico es utilizado para tratar el acné,  mientras este desinflama y al mismo tiempo cicatriza y previene proliferación de microorganismos.




Por lo general los preparados farmacéuticos no tiene registro INVIMA, ya que su uso no es superior a los 6 meses, y seria muy tedioso y complicado analizarlo sabiendo que esta certificación demora como mínimo 2 años de búsquedas al producto; en este tiempo ya el magistral ha caducado.




La mayoría de productos para preparación magistral son droga blanca y por lo mismo no necesitan certificado del INVIMA.

Manzanilla

Objetivo social:

Realizar  un producto con extractos  naturales de manzanilla para controlar la aparición, inflación y disminuir de las secuelas producidas por el acné.

Objetivo económico:

Garantizar la asequibilidad del producto por parte de toda la población por su alta efectividad y economía.

Objetivo administrativo:

Los ingredientes necesarios para realizar nuestro producto serán extractos de manzanilla, principio activo de  acido acetil salicílico.

Para llevarlo a cabo necesitamos también un lugar adecuado como un laboratorio que tenga control de microorganismos, asepsia y los equipos necesarios para dicha elaboración.

De igual forma, necesitamos personas idóneas con previos conocimientos en química para realizarlo.

Población objeto:

Este producto será dirigido a toda la población,  principalmente a los jóvenes entre los 13-30 años de edad tanto hombres como mujeres ya  que  presentan con mas frecuencia problemas de acné.

Posicionar el producto:

Buscaremos el lanzamiento de este producto por medio de plegables, pendones, entrega de volantes y anuncios publicitarios, ofreciéndolo en establecimientos  que lo dispensen  para que dicha población conozca el producto.

Planteamiento y solución al problema:

Teniendo en cuenta que el acné se presenta en la mayor parte de la población, pero más que todo en los jóvenes  debido a factores  hormonales, cosméticos, ambientales, emocionales y alimenticios; con este producto esperamos poder disminuir y tratar estas afecciones para que la persona se sienta bien consigo misma y mejore su  autoestima.

Metodología  

Nuestro producto para el acné lo realizaremos en el Sena, con los debidos conocimientos para hacerlo,  y algunas aprendices lo pondrán en practica, las encuestas también las realizamos en el Sena, para así dar solución al problema.

Producto terminado